如何利用Primer6.0进行引物的设计？
在Primer6.0推出后，相较于Primer5.0有一些功能和使用上的更新，笔者对软件的一些变化作一下简单的介绍。
操作方法
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首先，选取目的基因序列，对格式没有什么要求，只需要将目的基因序列复制就可以。
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打开File目录下的New，选择Sequence。这里的另一个Project选项是导入文件的方式，也就是将目的基因以文件形式保存的可以直接导入文件。一般通过复制的方式会更方便。
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打开Sequence后，会弹出粘贴框，只需要将刚刚复制的基因序列粘贴上即可，然后点击下方的Add。
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选择上方的红蓝双向箭头的按钮进行引物设计，在设计开始前可以更改设计的参数，包括搜索的碱基范围、引物的长度，碱基数，设计结果显示的引物对数等。
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设置完参数后，点击下方的Search，软件开始分析设计，完成后，点击OK。设计结果就会在下面显示出来。
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结果中蓝色为前引物，红色为后引物，Rating是对引物的综合评价分数，在上方也会显示引物的优劣，最好的为Best，中等为Good，最次的为Poor。一般选择引物都为Best或Good，其它显示均是无法使用的。
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在右边还有两个选项，All Primers可以查看可选择的多对不同引物。可以根据需要选择合适位置和适当产物长度的引物。选择后需要点击下方的Replace才能替换。
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All Structers则可以查看当前选定引物的结构，如发夹结构，引物二聚体和重复碱基等。
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引物选定完成后，点击下方的引物序列，再右键会弹出复制信息选项，进而将设计好的引物导出。也可以直接以文件的形式将结果导出。
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